骨细胞图谱与体外培养_朱国英2018P304

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,适读人群 :从事骨代谢基础研究的科研工作者,代谢性骨病临床诊治医师

  

本书结合作者研究室多年积累的研究成果,概括并讨论了作者的学术认识和论点,直观且系统地展现了研究室多年来在骨细胞体外分离培养、鉴定等领域的前沿技术与理念,填补了骨细胞基础研究领域的空白。其特点和优势在于:1.梳理了国内国际该领域的重大突破和前沿进展。2.书中的实验技术,是在参考国内外前沿研究资料基础上,结合研究室多年操作实践中不断改良积累的宝贵经验总结而成,代表了国内该领域的领先水平。3.全部照片均为作者实验室多年积累所得,其中成骨细胞、骨陷窝细胞等相关图片在国内外均属罕见,异常珍贵。本书的出版对进一步深入开展骨细胞基础研究和相关骨病临床诊治研究,以及骨质疏松防治药物药效研究有重要意义。

本书以生动直观的骨细胞图谱入手,辅以骨细胞培养的前沿研究进展,概括了骨细胞培养技术、骨细胞形态、生物学功能和基因分子调节机制以及生物力学、电离辐射、增龄衰老等细胞效应、病理改变、药效研究的前沿进展,直观且系统地展现骨细胞体外分离培养技术、鉴定、功能检测的前沿技术与理念。本书分三部分:第一部分为骨细胞图谱,涵盖了成骨细胞、骨陷窝细胞、破骨细胞、骨髓间充质干细胞/肾小管上皮细胞的培养/本书以生动直观的骨细胞图谱入手,辅以骨细胞培养的前沿研究进展,概括了骨细胞培养技术、骨细胞形态、生物学功能和基因分子调节机制以及生物力学、电离辐射、增龄衰老等细胞效应、病理改变、药效研究的前沿进展,直观且系统地展现骨细胞体外分离培养技术、鉴定、功能检测的前沿技术与理念。本书分三部分:第一部分为骨细胞图谱,涵盖了成骨细胞、骨陷窝细胞、破骨细胞、骨髓间充质干细胞/肾小管上皮细胞的培养/共培养技术,书中所有照片均为作者实验室或本人制作的照片,包括了光学显微/扫描电镜/透射电镜/激光共聚焦镜照片、不同功能状态(静息、活跃、衰老等)、不同病理形态和结构、骨细胞照片等,共200余幅。第二部分介绍骨细胞体外分离培养技术、鉴定、功能检测技术与方法,包括不同标本来源(大鼠/小鼠/人,骨骼/骨髓/外周血等),不同方法(酶消化法、组织贴块法、诱导培养法等)。第三部分为骨细胞体外培养技术在骨细胞病理学和药效学研究中的应用,着重介绍骨质疏松等代谢性骨病的成骨、破骨细胞的病理机制及其药效机制的前沿研究进展,尤其是骨细胞增龄衰老病理改变、力学作用的骨细胞效应、骨细胞病理的基因与分子机制、骨陷窝细胞的形态和功能研究等前沿进展,概括和研讨了作者的学术认识和论点。共培养技术,书中所有照片均为作者实验室或本人制作的照片,包括了光学显微/扫描电镜/透射电镜/激光共聚焦镜照片、不同功能状态(静息、活跃、衰老等)、不同病理形态和结构、骨细胞照片等,共200余幅。第二部分介绍骨细胞体外分离培养技术、鉴定、功能检测技术与方法,包括不同标本来源(大鼠/小鼠/人,骨骼/骨髓/外周血等),不同方法(酶消化法、组织贴块法、诱导培养法等)。第三部分为骨细胞体外培养技术在骨细胞病理学和药效学研究中的应用,着重介绍骨质疏松等代谢性骨病的成骨、破骨细胞的病理机制及其药效机制的前沿研究进展,尤其是骨细胞增龄衰老病理改变、力学作用的骨细胞效应、骨细胞病理的基因与分子机制、骨陷窝细胞的形态和功能研究等前沿进展,概括和研讨了作者的学术认识和论点。

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作者简介
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第1篇|骨细胞图谱001

第1章成骨细胞图谱002

第2章破骨细胞图谱032

第3章骨陷窝细胞图谱072

第2篇|骨细胞培养技术093

第4章成骨细胞体外培养、鉴定与功能检测技术094

第5章骨陷窝细胞体外培养、鉴定与功能检测技术115

第6章破骨细胞体外培养、鉴定与功能检测技术127

第7章细胞共培养技术158

第8章成骨细胞力学效应研究技术174

第3篇|骨细胞病理学和药效学研究应用与进展181

第9章骨细胞分化发育与功能的调控机制182

第10章成骨细胞与破骨细胞的耦联调控进展190

第11章间充质干细胞成骨分化的调控因子200

骨细胞图谱与体外培养

第12章良好血管结构和功能对骨健康起重要作用208

第13章力学作用的骨细胞效应研究217

第14章遗传性代谢性骨病的致病基因与分子机制研究221

第15章骨细胞的药物干预研究进展228

第16章维生素D及其类似物对骨细胞的调控及分子机制研究235

第17章中医“肾主骨”理论在骨质疏松症防治中的指导价值244

第18章补肾中药对成骨细胞分化的疗效机制研究251

第19章补肾中药对破骨细胞的调节作用258

第20章老年骨质疏松症骨细胞病理与治疗思考264

第21章降钙素药物的骨细胞药效与在老年骨质疏松症治疗中的应用272

第22章维生素D骨形成促进作用与在老年骨质疏松症治疗中的应用280

第23章放疗后骨丢失的病理生理及其细胞机制研究288

第24章骨形态计量学方法与研究进展295

附录|专业术语英汉对照299

骨细胞图谱

001

骨细胞图谱

第1章成骨细胞图谱

图1—1成骨细胞组织切片染色图(100×)002

图1—2成骨细胞组织切片染色图(40×)003

图1—3体外培养大鼠成骨细胞(1天)倒置相差显微镜活体观察(100×)004

图1—4体外培养大鼠成骨细胞(3天)倒置相差显微镜活体观察(100×)005

图1—5体外培养大鼠成骨细胞(5天)倒置相差显微镜活体观察(100×)006

图1—6体外培养大鼠成骨细胞(7天)倒置相差显微镜活体观察(100×)007

图1—7体外培养大鼠成骨细胞(12天)倒置相差显微镜活体观察(40×)008

图1—8成骨细胞荧光染色图(盐酸四环素,100×)009

图1—9成骨细胞碱性磷酸酶组化染色图(NBT/BCIP,200×)010

图1—10成骨细胞碱性磷酸酶组化染色图(钙钴法,200×)011

图1—11成骨细胞碱性磷酸酶组化染色图(NBT/BCIP)012

图1—12成骨细胞矿化结节茜素红染色图(40×)013

图1—13成骨细胞矿化结节四环素染色图(40×)014

图1—14成骨细胞矿化结节茜素红染色图(100×)015

图1—15成骨细胞细胞骨架激光共聚焦显微镜图(200×)016

图1—16成骨细胞基质前体PAS染色图(过碘酸—Schiff细胞化学染色)017

图1—17成骨细胞扫描电镜图(2000×)018

图1—18成骨细胞扫描电镜图(2000×)019

图1—19分裂相成骨细胞扫描电镜图(2000×)020

骨细胞图谱与体外培养

002

图1—20重叠生长成骨细胞扫描电镜图(2000×)021

图1—21游离状态成骨细胞透射电镜图(大鼠,第2继代,6000×)022

图1—22游离状态成骨细胞透射电镜图(大鼠,第2继代,6000×)023

图1—23贴壁状态成骨细胞透射电镜图(大鼠,第2继代,6000×)024

图1—24诱导分化成骨细胞透射电镜图(7500×)025

图1—25衰老成骨细胞扫描电镜图(大鼠,第25继代,1200×)026

图1—26衰老成骨细胞透射电镜图(大鼠,第25继代,40000×)027

图1—27人成骨细胞透射电镜图(49岁,男性,4000×)028

图1—28人成骨细胞透射电镜图(49岁,男性,5000×)029

图1—29成骨细胞矿化结节形成过程(100×)030

图1—30骨髓间充质干细胞(BMSC)成骨和成脂向分化过程031

第2章破骨细胞图谱

图2—1破骨细胞组织切片染色图032

图2—2小鼠RAW264.7细胞诱导生成的破骨细胞抗酒石酸酸性磷酸酶染色图

(100×)033

图2—3大鼠骨髓幼单核细胞诱导生成的破骨细胞抗酒石酸酸性磷酸酶染色图

(100×)034

图2—4人外周血单个核细胞诱导生成的破骨细胞抗酒石酸酸性磷酸酶染色图

(100×)035

图2—5体外培养大鼠破骨细胞倒置相差显微镜活体动态观察(200×)036

图2—6体外培养小鼠破骨细胞倒置相差显微镜活体动态观察037

图2—7破骨细胞Giemsa染色图(200×)038

图2—8破骨细胞HE染色图(200×)039

图2—9破骨细胞甲苯胺蓝染色图(200×)040

图2—10破骨细胞酸性磷酸酶(ACP)染色图(200×)041

图2—11不同状态破骨细胞抗酒石酸酸性磷酸酶染色图042

图2—12破骨细胞抗酒石酸酸性腺苷三磷酸酶染色图(200×)043

图2—13小鼠骨髓幼单核细胞诱导培养后不同时期破骨细胞图(100×)044

图2—14人外周血单个核细胞诱导培养后不同时期破骨细胞图045

图2—15小鼠RAW264.7细胞经RANKL诱导培养后不同时期破骨细胞图(100×)046

图2—16破骨细胞扫描电镜图(400×)047

图2—17破骨细胞扫描电镜图(700×)048

骨细胞图谱

图2—18破骨细胞扫描电镜图(1000×)049

图2—19破骨细胞扫描电镜图(4000×)050

图2—20破骨细胞扫描电镜图(700×)051

图2—21破骨细胞超微结构图(7500×)052

图2—22破骨细胞超微结构图(7500×)053

图2—23破骨细胞超微结构图(2500×)054

图2—24破骨细胞超微结构图(15000×)055

图2—25破骨细胞微管结构图(400×)056

图2—26破骨细胞F肌动蛋白分布图(200×)057

图2—27破骨细胞F肌动蛋白环结构形成图(100×)058

图2—28破骨细胞降钙素受体免疫组化染色图(ABC法,200×)059

图2—29破骨细胞骨吸收状态图(700×)060

图2—30破骨细胞骨吸收状态图(1500×)061

图2—31骨片吸收陷窝图(500×)062

图2—32骨片吸收陷窝图(1500×)063

图2—33骨片吸收陷窝图(400×)064

图2—34骨片吸收陷窝图(400×)065

图2—35骨片吸收陷窝图066

图2—36骨片吸收陷窝图067

图2—37骨片吸收陷窝图(200×)068

图2—38破骨细胞凋亡进程图(吖啶橙染色,200×)069

图2—39凋亡破骨细胞(TUNEL染色,200×)070

图2—40破骨细胞核(DAPI染色,100×)071

第3章骨陷窝细胞图谱

图3—1骨陷窝细胞扫描电镜图(1200×)072

图3—2骨陷窝细胞扫描电镜图(酸性蚀刻,400×)073

图3—3骨陷窝细胞扫描电镜图(酸性蚀刻,1000×)074

图3—4骨陷窝细胞扫描电镜图(酸性蚀刻,4000×)075

图3—5骨陷窝细胞扫描电镜图(酸性蚀刻)076

图3—6骨陷窝细胞组织切片染色图(HE染色,200×)077

图3—7骨陷窝细胞组织切片图(E11免疫组化染色,400×)078

图3—8骨小梁的骨陷窝细胞图(E11免疫组化染色,1000×)079

骨细胞图谱与体外培养

图3—97日龄小鼠骨陷窝细胞组织切片图(E11免疫组化染色,400×)080

图3—1028日龄小鼠骨陷窝细胞组织切片图(E11免疫组化染色,400×)081

图3—114月龄小鼠骨陷窝细胞组织切片图(E11免疫组化染色,400×)082

图3—12小鼠骨陷窝细胞组织切片图(LacZ染色,400×)083

图3—13体外培养MLO—Y4倒置相差显微镜照片(100×)084

图3—14MLO—Y4细胞倒置相差显微镜活体观察(100×)085

图3—15体外培养MLO—Y4细胞倒置相差显微镜照片(100×)086

图3—16原代培养骨细胞倒置相差显微镜照片087

图3—17体外培养IDG—SW3细胞倒置相差显微镜照片(100×)088

图3—18骨细胞和成骨细胞伊红染色 甲基绿核染(400×)089

图3—19骨陷窝细胞DAPI染色图(100×)090

图3—203月龄小鼠股骨骨皮质骨细胞FITC染色图(400×)091

 

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第1篇|骨细胞图谱001

第1章成骨细胞图谱002

第2章破骨细胞图谱032

第3章骨陷窝细胞图谱072

第2篇|骨细胞培养技术093

第4章成骨细胞体外培养、鉴定与功能检测技术094

第5章骨陷窝细胞体外培养、鉴定与功能检测技术115

第6章破骨细胞体外培养、鉴定与功能检测技术127

第7章细胞共培养技术158

第8章成骨细胞力学效应研究技术174

第3篇|骨细胞病理学和药效学研究应用与进展181

第9章骨细胞分化发育与功能的调控机制182

第10章成骨细胞与破骨细胞的耦联调控进展190

第11章间充质干细胞成骨分化的调控因子200

骨细胞图谱与体外培养

第12章良好血管结构和功能对骨健康起重要作用208

第13章力学作用的骨细胞效应研究217

第14章遗传性代谢性骨病的致病基因与分子机制研究221

第15章骨细胞的药物干预研究进展228

第16章维生素D及其类似物对骨细胞的调控及分子机制研究235

第17章中医“肾主骨”理论在骨质疏松症防治中的指导价值244

第18章补肾中药对成骨细胞分化的疗效机制研究251

第19章补肾中药对破骨细胞的调节作用258

第20章老年骨质疏松症骨细胞病理与治疗思考264

第21章降钙素药物的骨细胞药效与在老年骨质疏松症治疗中的应用272

第22章维生素D骨形成促进作用与在老年骨质疏松症治疗中的应用280

第23章放疗后骨丢失的病理生理及其细胞机制研究288

第24章骨形态计量学方法与研究进展295

附录|专业术语英汉对照299

骨细胞图谱

001

骨细胞图谱

第1章成骨细胞图谱

图1—1成骨细胞组织切片染色图(100×)002

图1—2成骨细胞组织切片染色图(40×)003

图1—3体外培养大鼠成骨细胞(1天)倒置相差显微镜活体观察(100×)004

图1—4体外培养大鼠成骨细胞(3天)倒置相差显微镜活体观察(100×)005

图1—5体外培养大鼠成骨细胞(5天)倒置相差显微镜活体观察(100×)006

图1—6体外培养大鼠成骨细胞(7天)倒置相差显微镜活体观察(100×)007

图1—7体外培养大鼠成骨细胞(12天)倒置相差显微镜活体观察(40×)008

图1—8成骨细胞荧光染色图(盐酸四环素,100×)009

图1—9成骨细胞碱性磷酸酶组化染色图(NBT/BCIP,200×)010

图1—10成骨细胞碱性磷酸酶组化染色图(钙钴法,200×)011

图1—11成骨细胞碱性磷酸酶组化染色图(NBT/BCIP)012

图1—12成骨细胞矿化结节茜素红染色图(40×)013

图1—13成骨细胞矿化结节四环素染色图(40×)014

图1—14成骨细胞矿化结节茜素红染色图(100×)015

图1—15成骨细胞细胞骨架激光共聚焦显微镜图(200×)016

图1—16成骨细胞基质前体PAS染色图(过碘酸—Schiff细胞化学染色)017

图1—17成骨细胞扫描电镜图(2000×)018

图1—18成骨细胞扫描电镜图(2000×)019

图1—19分裂相成骨细胞扫描电镜图(2000×)020

骨细胞图谱与体外培养

002

图1—20重叠生长成骨细胞扫描电镜图(2000×)021

图1—21游离状态成骨细胞透射电镜图(大鼠,第2继代,6000×)022

图1—22游离状态成骨细胞透射电镜图(大鼠,第2继代,6000×)023

图1—23贴壁状态成骨细胞透射电镜图(大鼠,第2继代,6000×)024

图1—24诱导分化成骨细胞透射电镜图(7500×)025

图1—25衰老成骨细胞扫描电镜图(大鼠,第25继代,1200×)026

图1—26衰老成骨细胞透射电镜图(大鼠,第25继代,40000×)027

图1—27人成骨细胞透射电镜图(49岁,男性,4000×)028

图1—28人成骨细胞透射电镜图(49岁,男性,5000×)029

图1—29成骨细胞矿化结节形成过程(100×)030

图1—30骨髓间充质干细胞(BMSC)成骨和成脂向分化过程031

第2章破骨细胞图谱

图2—1破骨细胞组织切片染色图032

图2—2小鼠RAW264.7细胞诱导生成的破骨细胞抗酒石酸酸性磷酸酶染色图

(100×)033

图2—3大鼠骨髓幼单核细胞诱导生成的破骨细胞抗酒石酸酸性磷酸酶染色图

(100×)034

图2—4人外周血单个核细胞诱导生成的破骨细胞抗酒石酸酸性磷酸酶染色图

(100×)035

图2—5体外培养大鼠破骨细胞倒置相差显微镜活体动态观察(200×)036

图2—6体外培养小鼠破骨细胞倒置相差显微镜活体动态观察037

图2—7破骨细胞Giemsa染色图(200×)038

图2—8破骨细胞HE染色图(200×)039

图2—9破骨细胞甲苯胺蓝染色图(200×)040

图2—10破骨细胞酸性磷酸酶(ACP)染色图(200×)041

图2—11不同状态破骨细胞抗酒石酸酸性磷酸酶染色图042

图2—12破骨细胞抗酒石酸酸性腺苷三磷酸酶染色图(200×)043

图2—13小鼠骨髓幼单核细胞诱导培养后不同时期破骨细胞图(100×)044

图2—14人外周血单个核细胞诱导培养后不同时期破骨细胞图045

图2—15小鼠RAW264.7细胞经RANKL诱导培养后不同时期破骨细胞图(100×)046

图2—16破骨细胞扫描电镜图(400×)047

图2—17破骨细胞扫描电镜图(700×)048

骨细胞图谱

图2—18破骨细胞扫描电镜图(1000×)049

图2—19破骨细胞扫描电镜图(4000×)050

图2—20破骨细胞扫描电镜图(700×)051

图2—21破骨细胞超微结构图(7500×)052

图2—22破骨细胞超微结构图(7500×)053

图2—23破骨细胞超微结构图(2500×)054

图2—24破骨细胞超微结构图(15000×)055

图2—25破骨细胞微管结构图(400×)056

图2—26破骨细胞F肌动蛋白分布图(200×)057

图2—27破骨细胞F肌动蛋白环结构形成图(100×)058

图2—28破骨细胞降钙素受体免疫组化染色图(ABC法,200×)059

图2—29破骨细胞骨吸收状态图(700×)060

图2—30破骨细胞骨吸收状态图(1500×)061

图2—31骨片吸收陷窝图(500×)062

图2—32骨片吸收陷窝图(1500×)063

图2—33骨片吸收陷窝图(400×)064

图2—34骨片吸收陷窝图(400×)065

图2—35骨片吸收陷窝图066

图2—36骨片吸收陷窝图067

图2—37骨片吸收陷窝图(200×)068

图2—38破骨细胞凋亡进程图(吖啶橙染色,200×)069

图2—39凋亡破骨细胞(TUNEL染色,200×)070

图2—40破骨细胞核(DAPI染色,100×)071

第3章骨陷窝细胞图谱

图3—1骨陷窝细胞扫描电镜图(1200×)072

图3—2骨陷窝细胞扫描电镜图(酸性蚀刻,400×)073

图3—3骨陷窝细胞扫描电镜图(酸性蚀刻,1000×)074

图3—4骨陷窝细胞扫描电镜图(酸性蚀刻,4000×)075

图3—5骨陷窝细胞扫描电镜图(酸性蚀刻)076

图3—6骨陷窝细胞组织切片染色图(HE染色,200×)077

图3—7骨陷窝细胞组织切片图(E11免疫组化染色,400×)078

图3—8骨小梁的骨陷窝细胞图(E11免疫组化染色,1000×)079

骨细胞图谱与体外培养

图3—97日龄小鼠骨陷窝细胞组织切片图(E11免疫组化染色,400×)080

图3—1028日龄小鼠骨陷窝细胞组织切片图(E11免疫组化染色,400×)081

图3—114月龄小鼠骨陷窝细胞组织切片图(E11免疫组化染色,400×)082

图3—12小鼠骨陷窝细胞组织切片图(LacZ染色,400×)083

图3—13体外培养MLO—Y4倒置相差显微镜照片(100×)084

图3—14MLO—Y4细胞倒置相差显微镜活体观察(100×)085

图3—15体外培养MLO—Y4细胞倒置相差显微镜照片(100×)086

图3—16原代培养骨细胞倒置相差显微镜照片087

图3—17体外培养IDG—SW3细胞倒置相差显微镜照片(100×)088

图3—18骨细胞和成骨细胞伊红染色 甲基绿核染(400×)089

图3—19骨陷窝细胞DAPI染色图(100×)090

图3—203月龄小鼠股骨骨皮质骨细胞FITC染色图(400×)091